RESUMO Os linfócitos intraepiteliais (IELs) parecem desempenhar papel importante na defesa e na tolerância induzidas pelo tecido linfocitário associado à mucosa (MALT). No epitélio das mucosas, os IELs expressam a integrina HML-1, que é a responsável pela sua aderência no epitélio. Neste trabalho, propõe-se estudar os mecanismos de expressão do HML-1 nos linfócitos do sangue periférico associados ao epitélio corneal limbar. Culturas do epitélio da córnea de diferentes doadores e de linfócitos do sangue periférico de um paciente foram estabelecidas. Três grupos de estudo foram determinados: Grupo A, linfócitos não-ativados juntamente com células epiteliais corneais limbares em meio de cultura; Grupo B, linfócitos não-ativados separados do epitélio por membrana semi-permeável em meio de cultura; Grupo C, linfócitos não-ativados em meio de cultura (controle). No sétimo dia, os linfócitos de todos os grupos foram recuperados e enviados para análise dos antígenos CDS/HML-1, CD3/CD8, CD3/CD4, CD3/CD25, CD8/CD25 e CD4/CD25 por citometria de fluxo. Comparações entre os grupos A, B e C foram realizadas pela análise de variância com medidas repetidas (ANOVA) e pelo teste t-Student para amostras pareadas. Diferenças estatisticamente significantes foram observadas em relação a expressão dos antígenos CD8/HML-1 (p=0,001), CD3/CD8 (p=0,006), CD3/CD25 (p=0,023) e CD8/CD25 (p=0,002). Este estudo permitiu concluir que a expressão do antígeno HML-1 pelos linfócitos periféricos CD8+ parece ser dependente da sua interação direta e indireta com o epitélio da córnea. A participação de fatores de crescimento e citocinas pelo epitélio têm, provavelmente, papel importante na expressão do antígeno HML-1.
SUMMARY The intraepithelial lymphocytes (IELs) may play an important role in the defense and tolerance induced by the mucosal associated lymphoid tissue (MALT). In the mucosal epithelium, IELs express the human mucosal lymphocyte integrin (HML-1), which is important in their adherence to the epithelial cells. In this experiment, the authors investigate the mechanisms of HML-1 expression on peripheral blood lymphocytes associated with corneal limbal epithelium. Lymphocitic and corneal epithelial cultures were performed. Three groups were determined: Group A, non-activated lymphocytes with corneal limbal epithelial cells in culture media; Group B, nonactivated lymphocytes separated by a semi-permeable membrane from epithelial cells in culture media; and group C, non-activated lymphocytes in culture media (control). In the seventh day, the lymphocytes were recovered and sent to jlow citometric analysis of the antigens CDS/HML-1, CD3/CD8, CD3/CD4, CD3/CD25, CD8/CD25 and CD4/CD25. Comparisons amongst groups A, B and C were dane by the repeated-measured statistical anaiysis (ANOVA) and Student's paired -t test. Statistically significant differences were observed in the following lymphocytic sub-populations: CD8/HML-1 + (p=0,001), CD3/CD8+ (p=0,006), CD3/CD25+ (p=0,023) e CD8/CD25+ (p=0,002). This experimental study suggests that the HML-1 expression by the CD8+ peripheral T lymphocytes increase may be dependent upon direct and indirect interactions with corneal epithelium. Growth factors and cytokines may play a role in HML-1 expression.